临床上常用的ANA实验方法是间接免疫荧光抗核抗体检测（IF-ANA）。抗核抗体阳性的判定因底物不同而不同，如以常规的鼠肝或鼠肾为底物，≥1:16稀释为阳性；以核质丰富的Hep-2细胞(人喉癌上皮细胞)为底物，≥1:40稀释为阳性；复合片（Hep-2细胞及猴肝切片）≥1:100稀释为阳性。检测抗核抗体是自身免疫性结缔组织病的重要筛选试验。抗核抗体阳性可见于多种疾病，如最常见于系统性红斑狼疮、系统性硬化症、干燥综合症、多发性肌炎/皮肌炎、类风湿关节炎及未分化结缔组织病等自身免疫性结缔组织病，也可见于非自身免疫性结缔组织病如慢性活动性肝炎、重症肌无力、慢性淋巴性甲状腺炎等，健康人可出现阳性，一般为5％～20％，年龄越大，阳性率越高，如>60岁的阳性率达20%～25%，有系统性红斑狼疮、干燥综合征或系统性硬化症家族史的一级亲属，阳性率可达50%。自身免疫性结缔组织病的抗核抗体阳性一般为高滴度，而非自身免疫性结缔组织病及正常人多为低滴度，因此了解抗核抗体的滴度有助于自身免疫性结缔组织病与其他疾病的鉴别。抗核抗体阳性者应进一步检查其具体核抗原组分的抗体如抗双链核糖核酸（ds-DNA）抗体、抗可提取核抗原（ENA）抗体等。另外，抗核抗体滴度是否与自身免疫性结缔组织病病情活动相关应主要参考其核抗原的具体组分，若抗核抗体中以抗ds-DNA抗体为主，则抗核抗体滴度与疾病的活动度相关，滴度越高，病情活动性越强，滴度随疾病治疗后可下降或转阴；若抗核抗体中以抗可提取核抗原抗体(如抗Sm、抗RNP、抗SSB等)为主，则抗核抗体滴度的消长与疾病活动性无明显相关性。